Técnicas

Célula
Los cultivos de células in vitro consisten en un sistema formado por células provenientes de un órgano o un tejido, normal o tumoral, mantenidas en medios de cultivo de composición química definida y en condiciones de temperatura, pH, aireación y humedad controladas. De esta forma se aseguran su supervivencia y multiplicación, manteniendo todas sus funciones metabólicas de una manera semejante a las que tenían en el huésped.

El cultivo celular tuvo su origen en el siglo XIX, como un método para el estudio del comportamiento de las células animales libres de las variaciones sistémicas ocurridas dentro del organismo y bajo el estrés de un experimento. En la actualidad, pueden cultivarse en el laboratorio células procedentes de una amplia gama de tejidos y organismos diferentes.

Cuando el cultivo proviene de células que han sido disgregadas de un tejido original recién extraído, recibe el nombre de Cultivo Primario. Cuando este cultivo primario es sometido a procesos de transformación que le confieren capacidad ilimitada de multiplicación, recibe el nombre de Línea Celular.
Los cultivos de células animales también se pueden clasificar de acuerdo a su capacidad de adherencia o no a una superficie determinada, pudiendo crecer en forma de monocapa o en suspensión.

Microscopio
Los cultivos de células animales tienen aplicación, como técnicas únicas o complementarias de otras, en un gran número de líneas de investigación. De esta forma han sido fundamentales para numerosos avances científicos alcanzados en distintas ramas de las ciencias biomédicas.
Así por ejemplo, las técnicas de cultivo celular permiten el estudio de las propias células, su metabolismo, el control del ciclo celular, la modulación de la expresión génica, el cultivo de virus, la clonación y el estudio de numerosos aspectos relacionados con el cáncer y su diagnóstico, por citar sólo algunos ejemplos.

Otra área de gran interés se centra en la biología del desarrollo, mediante la búsqueda de modelos experimentales que permitan explicar cómo el gran número de células presentes en organismo maduro derivan de una sola célula a partir de la fertilización. Por ello las líneas celulares que conservan la capacidad de diferenciarse in vitro son objeto de un intenso estudio.
Hay cierto tipo de investigaciones que no pueden realizarse sin el cultivo de células, por ejemplo, el trabajo con animales transgénicos, que conduce a que organismos maduros expresen genes nuevos, se basa totalmente en las técnicas de cultivo celular para la inserción de genes extraños en las células receptoras.

Diferenciación
Asimismo se han desarrollado numerosas aplicaciones para investigación en biología celular y bioquímica, en farmacología y toxicología, etc. La industria farmacéutica utiliza estas técnicas en los estudios para el desarrollo de nuevos fármacos. Además, se han desarrollado procesos industriales para la obtención de anticuerpos u hormonas y técnicas diagnósticas para el diagnóstico prenatal de enfermedades y para el cáncer, entre otras patologías.

Aplicaciones

Este servicio pone a disposición de la comunidad universitaria, así como a otras instituciones públicas y privadas, la posibilidad de cultivar todo tipo de células animales, tanto cultivos primarios como líneas celulares establecidas y realizar diferentes técnicas que permitan su estudio y caracterización a nivel molecular y celular.

Los objetivos de esta unidad son:
Ensayo diferencial
    • Facilitar a los usuarios el uso y aprovechamiento de las instalaciones de que dispone, poniendo a punto y manteniendo los aparatos y técnicas en cultivos para el máximo aprovechamiento de los usuarios.
    • Velar por el cumplimiento de las normas de trabajo de la Unidad de Cultivos para evitar en todo momento la contaminación de los cultivos derivada del uso colectivo de las instalaciones.

Además, se ofertan una serie de servicios opcionales, entre los que se incluyen:
    • Preparación de medios de cultivo, tampones, etc. bajo condiciones de esterilidad.
    • Entrenamiento en técnicas básicas de cultivos celulares.
    • Adquisición y puesta en marcha de una línea celular catalogada.
    • Mantenimiento de stocks frescos de líneas celulares en nitrógeno líquido.
    • Aislamiento de cultivos primarios de células endoteliales.
    • Mantenimiento de líneas celulares.
    • Mantenimiento de líneas no inmortalizadas con bajo número de pases.
    • Estudios de citotoxicidad.
    • Ensayo de morfogénesis de células endoteliales sobre matrigel.
    • Ensayo de Wound-Healing.
    • Obtención de medios acondicionados por las células.
    • Valoración de actividades proteolíticas por zimografía
    • Ensayos específicos de actividades enzimáticas concretas.
    • Servicio fotográfico.
    • Ensayos de detección de micoplasmas.

Equipamiento

El equipameinto del laboratorio comprende:
Nitrógeno líquido
    • Agitador giratorio NEW BRUNSWICK SCIENTIFIC, TC-8 LINE.
    • Agitador magnético SELECTA, ASINCRO.
    • Agitador magnético STUART SCIENTIFIC, SM11.
    • Agitador vortex HEIDOLDH, Reax 2000.
    • Autoclave MATACHANA, 211 LE 1M.
    • Balanza de precisión SARTORIUS, BP110S.
    • Balanza de precisión SARTORIUS, BP410.
    • Baño de incubación con termostato HAAKE W19
    • Bidestilador MILLI-Q185 PLUS
    • Bomba de aspiración DINKO, D-95.
    • Cabinas de flujo laminar vertical HOLTEN, HB 2448.
    • Cámara fotográfica NIKON, F-601M.
    Campana
    • Centrífuga con accesorios HERAEUS, LABOFUGE 400.
    • Centrífuga HERAEUS, BIOFUGE 13
    • Congelador LIEBHERR –20ºC.
    • Equipo de contaje y distribución celular Beckman Coulter Z2
    • Contenedor de nitrógeno líquido AIR LIQUID, GT 140.
    • Descalcificador ASTRA, CV-30.
    • Esterilizador ultravioleta SELECTA.
    • Fluorímetro para placas BIO-TEK, FL600.
    • Frigorífico LIEBHERR, RS3610 GSD300.
    • Horno de secado HERAEUS INSTRUMENTS, T6200.
    Toxicidad
    • Incubador de baja temperatura HERAEUS BK 600.
    • Incubadores de CO2 HERAEUS, 51 008 331.
    • Lámpara articulada LEICA, CLS 100.
    • Lavador de microplacas DASLAB, DG-34.
    • Lavadora de laboratorio MIELE, MIELABOR G.
    • Lector de microplacas WITTAKER, Microplate reader 2001.
    • Lupa LEICA, MZ6.
    • Máquina de hacer hielo SCOTSMAN AF-20-AS, AF20 ASB 0600.
    • Osmómetro crioscópico GONOTEC, Osmomat 030.
    • pH-metro CRISON, MICROPH 2000.
    • Ultracongelador –80ºC REVCO, ULT 1786-3-V12.

Personal Cultivos Celulares


Casimiro Cárdenas
D. Casimiro Cárdenas García
Técnico responsable
phone_icon40px +34 952 13 2379
email_icon40px ccg@uma.es
Ubicación
Edificio SCAI, Planta 1


Ana María Rodríguez
Dra. Ana Mª Rodríguez Quesada
Responsable científico
phone_icon40px +34 952 13 1281
email_icon40px quesada@uma.es
Ubicación Dpto. Biología Molecular y Bioqca - Fac. Ciencias
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