Cultivos Celulares

Técnicas

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Soporte científico y metodológico


La Unidad de Cultivos Celulares del SCAI pone a disposición de los grupos de investigación de la UMA y de otras instituciones públicas o privadas, la posibilidad de cultivar y mantener todo tipo de células animales, tanto cultivos primarios como líneas celulares estables, ofreciendo asesoramiento por personal especializado y la realización de ensayos con garantías de flexibilidad y adaptación a los requerimientos específicos, responsabilizándose del buen funcionamiento del laboratorio mediante un control estricto y una coordinación apropiada del uso de su equipamiento.

Apoyo técnico e instrumental


  • Análisis metabólico funcional en células vivas.
  • Citometría con uno o varios láseres.
  • Contaje electrónico de células.
  • Fotomicroscopía óptica en campo claro.
  • Fotomicroscopía de fluorescencia.
  • Espectrofotometría en diferentes soportes.
  • Fluorimetría multiplaca.
  • Criopreservación en nitrógeno líquido.

Realización de ensayos


Ensayos de detección de micoplasmas:
Los micoplasmas son células procariotas pequeñas que no poseen pared celular, contaminantes habituales de los cultivos celulares, difíciles de detectar y eliminar. Actualmente, se barajan datos de que entre el 50% y el 90% de las líneas celulares usadas en todo el mundo están contaminadas por micoplasmas.

Dado que la contaminación por micoplasmas no es tan evidente como la contaminación por bacterias o levaduras es importante realizar controles periódicos de su presencia. En la Unidad se llevan a cabo ensayos de detección de micoplasmas en las líneas celulares en marcha en el laboratorio de forma mensual, así como a demanda de los usuarios.

Además de ensayos a la carta, propuestos por el usuario y estudiados previamente por la Unidad, se ofertan una serie de ensayos opcionales, entre los que se incluyen:

Obtención y puesta en marcha de una línea celular catalogada.
  • Mantenimiento de línea celular.
  • Ensayos enzimáticos de toxicidad para screening.
  • Curvas de crecimiento para screening.
  • Aislamiento de células endoteliales de aorta bovina.
  • Aislamiento de células endoteliales de cordón umbilical suministradas por el usuario.
  • Ensayo de morfogénesis de células endoteliales sobre matrigel.
  • Ensayo de migración celular.
  • Mantenimiento de stocks frescos de líneas celulares en nitrógeno líquido.
  • Mantenimiento de líneas no inmortalizadas con bajo número de pases.
  • Obtención de medios acondicionados.
  • Valoración de actividades proteolíticas por zimografía

Aplicaciones

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En la actualidad, los cultivos celulares se han convertido en una herramienta imprescindible tanto para la investigación básica como para la investigación aplicada en el campo de las ciencias biomédicas, así como para algunos procesos industriales. Ejemplos de ello son el estudio del ciclo celular, la investigación y diagnóstico del cáncer, el cultivo de virus, sus aplicaciones en la reciente medicina regenerativa o las nuevas técnicas inmunológicas que requieren la preparación celular previa mediante técnicas de cultivo.
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Equipamiento

El equipamiento disponible:
  • Eclipse

    Nikon Eclipse Ti

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    Microscopio invertido con contraste de fases, módulo de fluorescencia y análisis de imagen Nikon Eclipse Ti.
    Se trata de un microscopio invertido para investigación con automatización inteligente fundamentada en la gestión integrada de todos los prismas, filtros etc., necesarios para cada técnica (fluorescencia, Contraste de fases, Contraste de Modulación, etc.) y para cada objetivo. El microscopio está dotado de:
    • Gestor de iluminación y sistema de regulación automática de la temperatura de color.
    • Iluminador de fluorescencia externo con lámpara de larga duración y gestor de intensidad, con bloques de filtros de fluorescencia para aplicaciones en azul, verde y rojo.
    • Cámara de incubación con controlador de temperatura, mezclador para 2 gases, módulo para control de humedad y adaptadores para placas de 6 pocillos y placas Petri.
    • Objetivo de larga distancia de trabajo (5, 10, 20, 40 y 63x).
    • Cámara digital de alta resolución y sensibilidad para microscopía con software de control que permite controlar todos los parámetros esenciales de la cámara y hacer mediciones básicas en las imágenes de forma automatizada, con módulos específicos de gestión de imágenes de fluorescencia, de grabación de vídeos y de gestión de experimentos de “time lapse”.
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  • seahorse

    SeaHorse xf24

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    El analizador de flujos celulares SeaHorse XF24 es un instrumento integrado, capaz de medir al mismo tiempo y sobre un formato de microplaca el rendimiento de las dos principales rutas energéticas celulares: la respiración aeróbica y la glucolisis. Este equipo ofrece la posibilidad de medir de forma simultánea la tasa de consumo de oxígeno, la tasa de CO2 y la tasa de acidificación del medio extracelular en un periodo de tiempo inferior a 5 minutos. Además, puede realizar medidas a tiempo real sobre una población celular durante minutos, horas o incluso días, permitiendo la reutilización de las muestras celulares tras la finalización del análisis.
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  • facsverse

    BD FACSVerse

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    El FACSVerse está dotado con 3 láseres y 8 fluorescencias que permiten analizar 10 parámetros simultáneamente. Las tres fuentes de emisión están separadas físicamente, con longitudes de onda de 405 nm, 488 nm y 635 nm. Posee, además, elementos adicionales para la adquisición automatizada de muestras, adquisición y tratamiento digital de datos y un sistema flexible de configuración por el usuario.
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  • arpege

    AirLiquide ARPEGE 170

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    Para el mantenimiento del Banco de Células del Servicio se cuenta con 2 unidades de almacenamiento en nitrógeno líquido (-196ºC), AIR LIQUID ARPEGE 170 y AIR LIQUID GT 140.
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  • cabina

    BIO-II Advance

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    Las cabinas de flujo tienen un triple propósito: 1) protección del personal de los posibles agentes dañinos del interior de la cabina, 2) protección del producto, experimento o cultivo que se encuentra en el interior de la cabina de los contaminantes exteriores o de la contaminación cruzada con otros productos o cultivos situados en la misma cabina y 3) protección medioambiental evitando la salida al medio ambiente de productos o agentes contaminantes. La Unidad cuenta con 3 Cabinas de Bioseguridad de Clase II: 2 cabinas Heraeus HB2448 Holten LaminAir y 1 cabina Telstar BIO-II Advance.
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  • heraell

    Heracell 150i

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    El objetivo de los incubadores de CO2 es el mantenimiento de la temperatura óptima para los cultivos, así como de una atmósfera con una tensión controlada de CO2 y en de condiciones de humedad elevada. La Unidad cuenta con 2 incubadores de CO2 HERAEUS 51 008 331, 2 incubadores Sanyo MCO-18AIC (UV), 1 incubador de CO2 para hipoxia Heracell 150i (Thermo Scientific) y 1 incubador de baja temperatura HERAEUS BK 600.
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  • matachan

    Matachana 211 LE 1M

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    La necesidad de asepsia para el cultivo de tejidos se extiende no sólo al medio en que se realiza el trabajo sino muy especialmente a los recipientes en que se realiza el cultivo, a los medios líquidos o sólidos, y a los instrumentos que puedan entrar en contacto con éste en algún momento de su manipulación (pipetas, puntas de pipeta automática, pinzas, tubos, material variado de vidrio...). Para esterilizar todo este material, en el Servicio existe un equipo de autoclave, MATACHANA, 211 LE 1M, que permite la esterilización por calor tanto de sólidos como de líquidos.
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  • coluter

    COULTER Z2

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    El contador electrónico de células es un instrumento capaz de contar y medir partículas en suspensión. Este instrumento fue comercializado por Coulter Electronics, y a pesar de que posteriormente se han desarrollado métodos alternativos es aún hoy en día el mecanismo más empleado. El modelo COULTER Z2, permite un control de doble rango del tamaño celular.
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  • ASAP 2020

    MILLI-Q Integral-5

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    El equipo de purificación de agua es de gran importancia para la preparación de los medios, de los aditivos, o de cualquier solución que pueda estar en contacto con el cultivo celular. Permite conseguir una absoluta esterilidad y la ausencia de sustancias que puedan provocar alguna alteración al cultivo. La Unidad cuenta con un equipo MILLI-Q Integral de MIllipore, capaz de producir dos calidades de agua, agua purificada y agua ultrapura.
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  • eon

    EON

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    Espectrofotómetro multivolumen que permite mediciones de volúmenes bajos (hasta 2 μL aprox.), o en cubetas estándar, dotado de un monocromador para lecturas entre 200 y 999 nm en incrementos de 1 nm. Posee capacidad de lectura de microplacas de 6 a 384 pocillos y análisis espectral, punto final, cinético, o análisis de área de pozo
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Otros equipos


  • PH-metro CRISON MICROPH 2000.
  • Balanzas de precisión SARTORIUS BP110S y SARTORIUS BP410.
  • Horno de secado HERAEUS INSTRUMENTS T6200.
  • Lupa LEICA MZ6.
  • Lámpara articulada LEICA CLS 100.
  • Esterilizador ultravioleta SELECTA.
  • Agitador giratorio NEW BRUNSWICK SCIENTIFIC TC-8 LINE.
  • Agitador magnético SELECTA ASINCRO y STUART SCIENTIFIC SM11.
  • Agitador vortex HEIDOLDH Reax 2000.
  • Contador CRISON Leucoform 2830.
  • Lavadora de laboratorio MIELE MIELABOR G.
  • Máquina de hielo SCOTSMAN.
  • Sistema de aspiración centralizado.
  • Baño termostatizado HAAKE W19.
  • Personal

    ¡Bienvenido!

    Auxiliadora López Jiménez

    Técnico Responsable
    Experiencia en Citometría de Flujo y Separación Celular, aplicaciones en Biología y Biomedicina, aislamiento de cultivos primarios de células endoteliales.experimentación, bienestar y protección animal en investigación y docencia.
    TELÉFONO
    +34 952132379
    CORREO
    alj@uma.es
    DIRECCIÓN
    Bulevar Louis Pasteur 33
    Edificio SCAI
    Planta Primera A1-06
    290171-Málaga
  • Información adicional

  • Portafolio de servicios

    • CCE001 Cuota por el uso de las instalaciones / personames.
    • CCE002 Ensayos de detección de micoplasmas.
    • CCE003 Fotografía microscópica digital / h.
    • CCE004 Microscopio de fluorescencia / h.
    • CCE005 Contador electrónico de células / h
    • CCE006 Fluorímetro multiplaca / h.
    • CCE007 Espectrofotómetro microplacas / ensayo.
    • CCE008 Criopreservación / vialesaño.
    • CCE009 Citrometría 1 láser.
    • CCE010 Citometría en varios láseres.
    • CCE011 Determinación de OCR y ECAR (placa de 24 pocillos).
    • CCE012 Test de estrés mitocondrial con determinación de OCR y ECAR (placa de 24 pocillos).
    • CCE013 Bacterias aerobias.
    • CCE014 Bacterias coliformes totales.
    • CCE015 Bacterias coliformes fecales.
    • CCE016 Escherichia coli.
    • CCE017 Enterococos.
    • CCE018 Clostridium.
    • CCE019 Análisis microbiológico en grifo del consumidor (RD 140/2003)
    • CCE020 Análisis microbiológico de control (RD 140/2003).
    • CCE021 Análisis microbiológico completo (RD 140/2003).
    • CCE022 Ensayo de endotoxinas.
    • CCE023 Desarrollo de ensayos / hora.
    • CCE024 Obtención y puesta en marcha de línea celular catalogada / línea.
    • CCE025 Mantenimiento de línea celular / semana.
    • CCE026 Mantenimiento de stocks frescos de líneas celulares criopreservadas / línea.
    • CCE027 Enterobacterias.
    • CCE028 Mohos y levaduras.
    • CCE029 Staphylococcus aureus.
    • CCE030 Pheudomonas aeruginosa.
    • CCE031 Salmonella.
    • CCE032 Microorganimos aerobios totales.
    • CCE033 Enterobacterias (recuento en VRBG, ISO7402).
    • CCE034 Turbidez.
  • Documentos de interés